Гистохимические методы исследования

Цито- и гистохимические методы позволяют выявлять химические соединения различных классов гистохимические методы исследования структурах клеток и тканей, а также их локализацию. Специфичность химической реакции в ряде случаев может быть проверена с помощью дополнительного контроля например, путем предварительного расщепления соответствующим ферментом. В основу цито- и гистохимических методов исследования положен ряд принципов. Избирательное окрашивание, при котором определенные химические группировки внутриклеточного вещества вступают в реакцию с красителем. Избирательное растворение красителя в определенном субстрате, характеризующем клеточную структуру. Перевод некоторых неактивных химических соединений, неспособных взаимодействовать с красителем, в активное состояние. Получение с гистохимические методы исследования промежуточных реакций неокрашенного продукта с гистохимические методы исследования переводом его в окрашенный. Так, специфичной для выявления ДНК является реакция Фельгена, которая основана на том, что альдегидные группы дезоксирибозы восстанавливают окраску основного фуксина, предварительно обесцвеченного сернистой кислотой реактив Шиффа. В результате реакции хроматин окрашивается в пурпурно-красный цвет. Для одновременного выявления ДНК и РНК часто применяют метод Браше с использованием метилового зеленого и пиронина. При этом способе метиловый зеленый окрашивает ДНК хромосом в зеленый цвет, а пиронин окрашивает РНК ядрышек и цитоплазмы в красный цвет. Выявление гликогена, гликопротеинов, гликолипидов — соединений, содержащих сахара, основано на окислении гликолевых групп последних до альдегидов с последующим взаимодействием гистохимические методы исследования реактивом Шиффа. Продукт реакции окрашивается в различные оттенки пурпурно-красного цвета. В случае выявления гликозаминогликанов гиалуроновая кислота, хондроитинсульфат, кератансульфат, гепарансульфат, гепарин используют способность их анионных групп связываться при низких значениях рН с основными красителями или давать метахроматическое окрашивание с тиазиновыми красителями — толуидиновым синим, азуром. Выявление липидов основывается на их способности окрашиваться растворенными в них красителями, например Суданом. Сочетание цито- и гистохимических методов исследования с методом электронной микроскопии послужило основой развития электронной гистохимии.

Также смотрите:

Комментарии:
  • Волька Иванов

    18.11.2015

    Получение с помощью промежуточных реакций неокрашенного продукта с последующим переводом его в окрашенный.